پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

كوآنزیم
ایزوپرنوئیدها
تركیبات آلی
دكاپرنیل دی فسفات سنتاز
آگروباكتریوم تومی فاسینس
ردوباكتر اسفروئیدس
دانلود پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم
دانلود پایان نامه كوآنزیم

رفتن به سایت اصلی

دانلود پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

 

 

چكیده:

ایزوپرنوئیدها از بزرگترین تركیبات آلی در طبیعت بوده كه دارای نقشهای گوناگون بیولوژیكی در بدن موجودات زنده از جمله انسان می باشند، از اینرو این تركیبات از اهمیت بسیار بالایی از نظر پزشكی و غذایی و حتی دارویی برخوردار هستند. از جمله مهمترین این تركیبات می توان به یوبی كینونها اشاره نمود كه هنگام تنفس سلولی در زنجیره انتقال الكترون دارای نقش بسیار مهمی می باشند. این تركیبات هموپلیمرهایی از واحدهای ایزوپرنی به نام ایزوپنتیل پیرو فسفات (IPP) با ویژگی های ساختاری و فیزیكوشیمیایی مختلف هستند.

 

دو آنزیم “فارنزیل دی فسفات سنتاز” و “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” مسئول بیوسنتز دو تركیب “فارنزیل دی فسفات” و “ژرانیل ژرانیل دی فسفات” كه به ترتیب هر كدام از 3 و 4 واحد ایزوپرنی تشكیل شده اند. این تركیبات می توانند به عنوان سوبسترا جهت سنتز دیگر تركیبات ایزوپرنوئیدی و از جمله كوآنزیم Q10 مورد استفاده قرار گیرند.در این مطالعه، تاثیر بیان ژنهای کد کنندهء آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی و یا همراه با دیگرآنزیمهای مسیر بیوسنتز لیكوپن بر روی آنزیم “دکاپرنیل دی فسفات سنتاز” ( آنزیم مسئول ساخت زنجیرهء ایزوپرنوئید كوآنزیم Q10 ) و در نهایت تولید كوآنزیم Q10 در سویه های نوتركیب باكتری “اشرشیاكلی ” مطالعه می گردد.

 

 

کلمات کلیدی:

Coenzyme

كوآنزیم

ایزوپرنوئیدها

تركیبات آلی

دكاپرنیل دی فسفات سنتاز

آگروباكتریوم تومی فاسینس

ردوباكتر اسفروئیدس

 

 

 

 

 

مواد و روشها:

در این پژوهش ژنهای هترولوگوس كد كننده آنزیم “دكاپرنیل دی فسفات سنتاز” (dds) از دو گونهء باكتریایی “آگروباكتریوم تومی فاسینس” (atdds) و “ردوباكتر اسفروئیدس” (rsdds) استخراج شده و بوسیلهء دو پلاسمید جداگانه به درون باكتری اشرشیاكلی سویه DH5α كلون گردیدند كه نتیجهء آن ایجاد توانایی تولید كوآنزیم Q10 در این باكتری بود. در ادامه میزان تولید این تركیب در سلولهای نو تركیب حاصله با دستگاه HPLC مورد ارزیابی قرار گرفت.

 

به منظور مطالعه اثر آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی و یا همراه با  دیگر آنزیمهای مسیر بیوسنتز لیكوپن بر روی تولید كوآنزیم Q10 نیز؛ ژنهای مربوطه ( crtE, crtB, crtI ) از باكتری “اروینیا هربیكولا” استخراج شده و بوسیله پلاسمیدهای جداگانه به درون سلولهای نوتركیب اشرشیاكلی تولید كنندهء كوآنزیم Q10 كلون گردیدند. سلولهای نوتركیب حاصله در محیط كشت “2YTG” در دمای 30 درجه سانتی گراد كشت داده شدند و سپس تولید كوآنزیم Q10 در هر سلول مورد ارزیابی قرار گرفت.

 

نتایج:

بیان دو ژن atdds و rsdds در باكتری اشرشیاكلی با شناسایی پیك كوآنزیم Q10 توسط دستگاه HPLC مورد تائید قرار گرفت. بطور كلی برای شناسایی و اندازه گیری كوآنزیم Q ها از یك شناساگر اشعهء UV در طول موج 275 نانومتر استفاده می شود.به منظور اندازه گیری غلظت كوآنزیم Q10 تولید شده در سلولهای نوتركیب نیز از منحنی استاندارد كوآنزیم Q10 استفاده گردید.نتایج بدست آمده نشان داد كه بیان ژن كدكنندهء آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی در باكتری نوتركیب اشرشیاكلی كه حاوی یكی از دو ژن atdds و یا rsdds می باشد ، افزایش چشمگیری در میزان تولید كوآنزیم Q10 ایجاد نمی نماید و حتی در بعضی موارد منجر به كاهش تولید نیز می گردد.

 

از طرف دیگر بیان ژن كدكننده آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” همراه با بیان ژهای كدكنندهء آنزیم های “فیتوئن سنتاز” و “فیتوئن دساتوراز” ، كه همگی در مسیر بیوسنتز لیكوپن وجود دارند، منجر به مشاهدهء نتایج متفاوتی در میزان تولید كوآنزیم Q10 در سلولهای نوتركیب حاوی atdds و یا rsdds شده است. بطوریكه بیان ژنهای كدكنندهء مسیر بیوسنتز لیكوپن زمانی كه با ژن atdds همراه هستند، اثر قابل توجهی در میزان تولید كوآنزیم Q10 نمی گذارند، در حالیكه وقتی این ژنها با ژن rsdds همراه می شوند منجر به افزایش چشمگیری در تولید این تركیب می گردند.

 

 

 

 

فهرست مطالب

چكیده

فصل اول (كلیات) 1

1.مقدمه : 2

2.تاریخچه كوآنزیم Q10: 3

3.بررسی ساختمان كوآنزیم Q: 3

4.  بررسی واکنشهای اکسیداسیون و احیاء در كوآنزیم Q10 : 5

5.مسیر بیوسنتز” كوآنزیم Q10 : 7

5-1 مسیر سنتز زنجیرهء ایزوپرنوئیدی: 10

5-2 ساخت حلقهء یوبی كینونی: 11

5-3 اتصال حلقه به زنجیرهء ایزوپرنوئیدی و تغییرات بعدی آن: 11

6.بررسی آنزیم های کلیدی در مسیر سنتز کوآنزیمQ10  : 15

7. تاثیر مسیر بیوسنتز ایزوپرنوِِئیدها برروی تولید یوبی كینون ها: 22

7-1 مسیر بیوسنتز لیكوپن: 23

8.نقص كوآنزیم Q10 : 26

9.نقش كوآنزیم Q10 : 27

10 اثرات داروهای استاتینی بر روی بیوسنتز كوآنزیم Q10: 37

11 اهداف پژوهش : 40

12. استراتژی پژوهش : 41

13. نكات مهم پژوهش : 49

 

فصل دوم (مواد و روشها) 51

◙ مواد مورد استفاده در این پژوهش: 52

1 اسامی ژن های مورد استفاده: 52

اسامی پلاسمید های مورد استفاده: 52

3 آنزیم های مورد استفاده: 53

4 دستگاههای مورد استفاده در این پژوهش: 53

5 كیت های مورد استفاده در این پژوهش: 56

6 مواد ومحلول های مورد استفاده در این پژوهش : 57

◙ روش ها: 60

1. تهیه انواع محیط كشت: 60

2. استفاده از انواع آنتی بیوتیك ها در محیط های كشت : 63

3. تهیه سلول مستعد: 64

4. انتقال ژن خارجی به سلول های مستعد : 67

5. تكنیك PCR: 69

6 الكتروفورز با ژل آگارز : 73

7. خالص سازی ژن از ژل آگارز : 79

8 استفاده از آنزیم های برش دهنده: 81

9. خالص سازی نمونه DNA از آنزیم های موجود در محیط واكنش: 84

10 استخراج پلاسمید : 85

11. استخراج كوآنزیم Qاز باكتری تولید كننده: 88

12. محاسبه وزن خشك سلول : 91

13. دستگاه “pH متر”: 92

14. دستگاه “اسپكتروفتومتر” : 93

.15. دستگاه تبخیر كننده: 94

16 كروماتوگرافی “HPLC”: 94

 

فصل سوم (نتایج) 98

1.ساخت پلاسمیدهای نوترکیب: 99

1-1. ساخت پلاسمید “pDcrtE” 99

1-2. ساخت پلاسمید “pTcrtE” : 107

1-3. ساخت پلاسمید “pTlycm3” 110

1-4.ساخت پلاسمید “pBrsdds” : 118

1-5. تکثیر پلاسمید “pBatdds” 126

2. ساخت سلولها: 127

2-1  ساخت سلول E.coli-Ba: 128

2-2  ساخت سلول E.coli-Br: 129

2-3 ساخت سلول E.coli-BaDc: 129

2-4. ساخت سلول E.coli-BrDc: 129

2-5. ساخت سلول E.coli-BaTc: 129

2-6. ساخت سلول E.coli-BrTc: 130

2-7. ساخت سلول E.coli-BaTl: 130

2-8. ساخت سلول E.coli-BrTl: 130

3 اندازه گیری كوآنزیمQ10 سنتز شده در سلولهای نوتركیب: 130

3-1 انتقال سلول ها به محیط كشت : 131

3-2 استخراج كوآنزیم  Qسنتز شده از سلول های نوترکیب: 133

3-3 اندازه گیری كوآنزیم Q با روش كروماتوگرافی “HPLC” : 133

4.نتایج و یافته ها : 141

5 بحث و بررسی : 146

6. پیشنهادات: 150

 

فصل چهارم (منابع) 151

منابع انگلیسی : 152

منابع فارسی: 162

 

 

 

فهرست تصاویر

فصل اول

تصویر شماره 1-1 شمای ساختار انواع كوآنزیم Q ………………………………………………………….3

تصویر شماره 1-2 شمای ساختار كوآنزیم Q3 ……………………………………………………………….4

تصویر شماره 1-3 شمای ساختار سمی كینون ………………………………………………………………..5

تصویر شماره 1-4 شمای ساختار یوبی كینول ………………………………………………………………..5

تصویر شماره 1-5 سیكل كوآنزیم Q …………………………………………………………………………..6

تصویر شماره 1-6 شمای مسیر موالونات و غیر موالونات تا سنتز كوآنزیم Q10………………………….9

تصویر شماره 1-7 شمای ساخت حلقه یوبی كینونی …………………………………………………………..11

تصویر شماره 1-8 مسیر سنتز كوآنزیم Q10 …………………………………………………………………12

تصویر شماره 1-9 مراحل بیوسنتز كوآنزیم Q در باكتری “اشرشیاكلی” و مخمر “ساكارومایسس سرویزیه”…..13

تصویر شماره 1-10 مسیر بیوسنتز لیكوپن…………………………………………………………………….25

تصویر شماره 1-11 زنجیره انتقال الكترون در یوكاریوتها…………………………………………………..29

تصویر شماره 1-12 شمای نقش كوآنزیم Q10 در شكل گیری باند دی سولفیدی …………………………..30

تصویر شماره 1-13 شمای نقش كوآنزیم Q10 به عنوان عامل اكسید كننده سولفید…………………………31

تصویر شماره 1-14 شمای ارتباط مسیر سنتز كوآنزیم Q با مسیر سنتز كلسترول…………………………38

تصویر شماره 1-15 شمای پلاسمید pBBR1MCS2……………………………………………………….43

تصویر شماره 1-16 شمای پلاسمید pBAD24 ………………………………………………………………44

تصویر شماره 1-17 شمای عملكرد پروموتور آرابینوز در وكتور pBAD24……………………………..46

تصویر شماره 1-18 شمای پلاسمید pTrc99A ……………………………………………………………..46

فصل دوم

تصویر شماره 2-1 تصویر محیط كشت جامد موجود در plate …………………………………………….60

تصویر شماره 2-2 دستگاه PCR ……………………………………………………………………………..69

تصویر شماره 2-3 دستگاه الكتروفورز ……………………………………………………………………….73

تصویر شماره 2-4 دستگاه pH متر…………………………………………………………………………….92

تصویر شماره 2-5 دستگاه اسپكتروفتومتر……………………………………………………………………..93

تصویر شماره 2-6 دستگاه تبخیر كننده ………………………………………………………………………..94

تصویر شماره 2-7 دستگاه HPLC ……………………………………………………………………………95

فصل سوم

تصویر شماره 3-1 توالی ژن crtE …………………………………………………………………………..100

تصویر شماره 3-2 شمای مراحل ساخت پلاسمید pDcrtE …………………………………………………101

تصویر شماره 3-3 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pBAD24 ……………………………………….101

تصویر شماره 3-4 شمای دو پرایمر برگشتی و پیشرونده برای تكثیر ژن crtE …………………………..103

تصویر شماره 3-5 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن crtE ………………………………………………….103

تصویر شماره 3-6 پلاسمید خطی شده pBAD24 ……………………………………………………………104

تصویر شماره 3-7 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pDcrtE ……105

تصویر شماره 3-8 شمای پلاسمید pDcrtE ………………………………………………………………….106

تصویر شماره 3-9 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pDcrtE………………………………….106

تصویر شماره 3-10 شمای مراحل ساخت پلاسمید pTcrtE ……………………………………………….107

تصویر شماره 3-11 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTrc99A …………………………………….107

تصویر شماره 3-12 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pTrc99A …………………………108

تصویر شماره 3-13 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pTcrtE …..109

تصویر شماره 3-14 شمای پلاسمید pTcrtE ………………………………………………………………..109

تصویر شماره 3-15 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pTcrtE ………………………………..110

تصویر شماره 3-16 توالی ژن crtB …………………………………………………………………………111

تصویر شماره 3-17 توالی ژن crtI …………………………………………………………………112 و 113

تصویر شماره 3-18 شمای مراحل ساخت پلاسمید pTlycm3 ……………………………………………..113

تصویر شماره 3-19 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTlycm4 ……………………………………..114

تصویر شماره 3-20 نمای الكتروفورز ژل آگارز 3 ژن موجود در پلاسمید pTlycm4 ………………….115

تصویر شماره 3-21 نمای الكتروفورز ژل آگارز 3 ژن جدا شده از پلاسمید pTlycm4 …………………115

تصویر شماره 3-22 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pTlycm4…116

تصویر شماره 3-23 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pTrc99A پس از خالص سازی …117

تصویر شماره 3-24 شمای پلاسمید pTlycm3 ……………………………………………………………..117

تصویر شماره 3-25 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pTlycm3 ……………………………..118

تصویر شماره 3-26 توالی ژن rsdds ……………………………………………………………………….119

تصویر شماره 3-27 شمای مراحل ساخت پلاسمید pBrsdds ……………………………………………..120

تصویر شماره 3-28 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTrsdds ……………………………………..121

تصویر شماره 3-29 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن rsdds جدا شده از پلاسمید pTrsdds ……………122

تصویر شماره 3-30 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن rsdds خالص سازی شده ………………………….122

تصویر شماره 3-31 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pBBR1MCS2 ……………………………..123

تصویر شماره 3-32 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pBBR1MCS2 ………………….124

تصویر شماره 3-33 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pBBR1MCS2 خالص سازی شده………124

تصویر شماره 3-34 شمای پلاسمید pBrsdds ……………………………………………………………….125

تصویر شماره 3-35 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pBrsdds ………………………………..125

تصویر شماره 3-36 توالی ژن atdds ……………………………………………………………………….126

تصویر شماره 3-37 شمای پلاسمید pBatdds ………………………………………………………………127

تصویر شماره 3-38 شمای مراحل ساخت سلولهای نوتركیب …………………………………………………128

تصویر شماره 3-39 پیك مربوط به كوآنزیم Q10 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ……….135

تصویر شماره 3-40 پیك مربوط به كوآنزیم Q8 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ………..136

تصویر شماره 3-41 پیك مربوط به كوآنزیم Q9 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ………..136

تصویر شماره 3-42 پیك كوآنزیم Q شناسایی شده در نمونه مجهول توسط دستگاه HPLC………………137

تصویر شماره 3-43 پیك كوآنزیم Q شناسایی شده در نمونه مجهول توسط دستگاه HPLC………………147

 

 

فهرست جداول

فصل اول

جدول شماره 1-1 انواع ژنهای كد كننده مسیر بیوسنتز كوآنزیم Q در “اشرشیاكلی” و “ساكارومایس سرویزیه”…..15

جدول شماره 1-2 انواع آنزیم های “پلی پرنیل دی فسفات سنتاز”……………………………………………..16

فصل دوم

جدول شماره 2-1 نام ژنهای مورد استفاده به همراه ویژگی آنها ………………………………………………52

جدول شماره 2-2 نام پلاسمیدهای مورد استفاده…………………………………………………………………52

جدول شماره 2-3 نام آنزیم های برش دهنده مورد استفاده……………………………………………………..53

جدول شماره 2-4 آنتی بیوتیك های مورد استفاده……………………………………………………………….63

جدول شماره 2-5 ویژگی كامل آنزیم های برش دهنده مورد استفاده…………………………………………..83

جدول شماره 2-6 ویژگی كامل آنزیم DNA T4” لیگاز”……………………………………………………..84

فصل سوم

جدول شماره 3-1 اسامی پلاسمیدهای نوتركیب ساخته شده…………………………………………………….99

جدول شماره 3-2 اسامی سلولهای نوتركیب ساخته شده……………………………………………..127 و 128

جدول شماره 3-3 اندازه سطح زیر منحنی نمونه كوآنزیم Q10 استاندارد در غلظتهای مختلف…………..134

جدول شماره 3-4  غلظت كوآنزیم Q10 محاسبه شده در سلولهای نوتركیب ………………………137و 138

جدول شماره 3-5 وزن خشك سلولی محاسبه شده سلولهای نوتركیب……………………………….139 و 140

جدول شماره 3-6 مقدار تولید كوآنزیم Q10 در سلولهای نوتركیب………………………………………….141

 

فهرست نمودارها

فصل سوم

نمودار شماره 3-1 منحنی استاندارد كوآنزیم Q10 …………………………………………………………..135

نمودار شماره 3-2 منحنی استاندارد وزن خشك سلولی……………………………………………………….139

نمودار شماره 3-3 اثر ژن crtE ( بر روی وكتور pBAD24 ) در تولید كوآنزیم Q10 …………………142

نمودار شماره 3-4 اثر ژن crtE ( بر روی وكتور pTrc99A) در تولید كوآنزیم Q10 …………………143

نمودار شماره 3-5 اثر ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن در تولید كوآنزیم Q10 ……………………………….144

نمودار شماره 3-6 اثر ژن crtE و ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن به هراه ژن atdds در تولید كوآنزیم Q10…145

نمودار شماره 3-7 اثر ژن crtE و ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن به هراه ژن rsdds در تولید كوآنزیم Q10….145

 

فهرست معادلات

فصل اول

معادله 1-1 معادله انتقال الكترون از كوآنزیم Q10 به كمپلكس بعد از آن ……………………………………28

فصل دوم

معادله 2-1 معادله محاسبه pH ………………………………………………………………………………….92

فصل سوم

معادله 3-1 معادله محاسبه غلظت كوآنزیم Q10 تولید شده در سلولهای نوتركیب………………………….140

 

 

 

 

 

 

 

 

  • بررسی تجارب بازسازی روستای توتکابن بعد از زلزله 1369 گیلان و زنجان از دیدگاه توسعه

    بررسی تجارب بازسازی روستای توتکابن بعد از زلزله 1369 گیلان و زنجان از دیدگاه توسعه سانحه بازسازی فاجعه زلزله گیلان مدیریت سانحه بررسی تجارب بازسازی روستای توتکابن بعد از زلزله 1369 گیلان و زنجان از دیدگاه توسعه دانلود مقالات رشته…

  • ارزیابی تاثیر هزینه های دولت بر رشد اقتصادی در ایران

    ارزیابی تاثیر هزینه های دولت بر رشد اقتصادی در ایران بررسی مخارج دولت رابطه بین هزینه دولت و رشد اقتصادی رشد اقتصادی در ایران بررسی تأثیر مخارج دولت بر روی رشد اقتصادی ارزیابی تاثیر هزینه های دولت بر رشد اقتصادی…

  • پاورپوینت بناهای تاریخی روسیه

    پاورپوینت بناهای تاریخی روسیه پاورپوینت زیباترین شهر روسیه پاورپوینت دیدنی ترین شهرهای روسیه پاورپوینت روسیه پاورپوینت بناهای تاریخی پاورپوینت در مورد بناهای تاریخی پاورپوینت در مورد بناهای تاریخی روسیه رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت بناهای تاریخی روسیه جهت رشته…

  • پایان نامه سلامت روان دانشجویان

    پایان نامه سلامت روان دانشجویان کلمات کلیدی : پایان نامه سلامت روان پایان نامه سلامت روانی پایان نامه روانشناسی سلامت پایان نامه درباره سلامت روانی موضوع پایان نامه روانشناسی سلامت دانلود پایان نامه سلامت روان دانشجویان پایان نامه در مورد…

  • پاورپوینت ایجاد اشتغال با فناوری

    پاورپوینت ایجاد اشتغال با فناوری پاورپوینت نقش فناوری در محیط کار چیست پاورپوینت در اثر توسعه فناوری چه مشاغلی ایجاد شده پاورپوینت تاثیر فناوری بر مشاغل جدید پاورپوینت نحوه تاثیر فناوری های نو بر مشاغل امروزی رفتن به سايت اصلي…

  • پاورپوینت ویژگیهای فنی وموثر در انتخاب و بکارگیری مصالح

    پاورپوینت ویژگیهای فنی وموثر در انتخاب و بکارگیری مصالح دانلود پاورپوینت ویژگیهای فنی وموثر در انتخاب و بکارگیری مصالح پاورپوینت ویژگیهای فنی در انتخاب و بکارگیری مصالح رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت ویژگیهای فنی وموثر در انتخاب و بکارگیری…

  • پاورپوینت آزمایشات آزمایشگاه شیمی معدنی 1

    پاورپوینت آزمایشات آزمایشگاه شیمی معدنی 1 پاورپوینت آزمایشگاه شیمی معدنی 1 دانلود پاورپوینت آزمایشگاه شیمی معدنی 1 پاورپوینت درباره آزمایشگاه شیمی معدنی 1 رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آزمایشگاه شیمی معدنی 1 جهت رشته شیمی در قالب 185 اسلايد…

  • پاورپوینت مدیریت کیفیت فراگیر

    پاورپوینت مدیریت کیفیت فراگیر دانلود پاورپوینت مدیریت کیفیت فراگیر پاورپوینت مدیریت کیفیت فراگیر پاورپوینت مدیریت فراگیر جهت فراهم آوردن محصول با کیفیت پاورپوینت TQM دانلود پاورپوینت TQM رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت مدیریت کیفیت فراگیر جهت رشته مدیریت در…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق سلامت اجتماعی

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق سلامت اجتماعی کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه سلامت اجتماعی مبانی نظری سلامت اجتماعی دانلود مبانی نظری سلامت اجتماعی پیشینه تحقیق سلامت اجتماعی دانلود پیشینه تحقیق سلامت اجتماعی پیشینه داخلی سلامت اجتماعی پیشینه خارجی…

  • دانلود پاورپوینت فیثاغورس ریاضی هشتم

    دانلود پاورپوینت فیثاغورس ریاضی هشتم دانلود پاورپوینت فیثاغورس ریاضی هشتم پاورپوینت فیثاغورس ریاضی هشتم دانلود پاورپوینت فیثاغورس دانلود پاورپوینت فیثاغورس چیست دانلود پاورپوینت فیثاغورس کیست دانلود پاورپوینت چطور رابطه فیثاغورس ایجاد میشود رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت فیثاغورس ریاضی…

  • معرفی کامل و جامع سازمان الف

    معرفی کامل و جامع سازمان الف تشكیلات ستاد مركزی سازمان الف بررسی های جمعیت شناسی سازمان الف ویژگی ها و مشخصات بیانیه رسالت تكنیك ها و فن آوری های سازمان الف یانیه رسالت حوزه منابع انسانی ناجا سازمان الف بیانیه…

  • دانلود پاورپوینت جوشکاری

    دانلود پاورپوینت جوشکاری پاورپوینت در مورد انواع جوشکاری پاورپوینت خطرات جوشکاری پاورپوینت تجهیزات جوشکاری رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت جوشکاری جهت رشته عمران در 16 اسلاید و با فرمت pptx  بصورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش  …

  • پاورپوینت روش استفاده از متون علمی شیمی

    پاورپوینت روش استفاده از متون علمی شیمی دانلود پاورپوینت روش استفاده از متون علمی شیمی دانلود پاورپوینت درمورد روش استفاده از متون علمی شیمی رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت روش استفاده از متون علمی شیمی جهت رشته شیمی در…

  • پروپوزال ارزیابی علل تاثیرگذار بر قواعد برنامه سازی خلاق در رادیو و شناسایی اجزا و خصوصیات آن

    پروپوزال ارزیابی علل تاثیرگذار بر قواعد برنامه سازی خلاق در رادیو و شناسایی اجزا و خصوصیات آن برنامه سازی خلاق در رادیو اصول برنامه سازی خلاق در رادیو شناسایی ابعاد برنامه سازی خلاق در رادیو شناسایی مولفه های برنامه سازی…

  • پاورپوینت صدا در معماری

    پاورپوینت صدا در معماری دانلود پاورپوینت صدا در معماری پاورپوینت تحقیق راحب صدا در معماری پاورپوینت صدا رشته معماری دانلود پاورپونیت صدا ها و انواع آن در معماری رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت صدا در معماری جهت رشته معماری در…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق ادراک زیر آستانه ای

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق ادراک زیر آستانه ای مبانی نظری ادراک زیر آستانه ای ادبیات نظری ادراک زیر آستانه ای چارچوب نظری ادراک زیر آستانه ای فصل دوم پایان نامه ادراک زیر آستانه ای دانلود مبانی نظری ادراک زیر…

  • مبانی نظری ارزیابی واکنش بازار سهام در برابر اطلاعیه های سود نقدی بورس اوراق بهادار تهران

    مبانی نظری ارزیابی واکنش بازار سهام در برابر اطلاعیه های سود نقدی بورس اوراق بهادار تهران اعلامیه های سود نقدی تفاضل بازده قیمتی سهام اعلامیه های سود نقدی شرکتها رابطه اعلامیه های سود نقدی با بازده نقدی رابطه اعلامیه های…

  • پرسشنامه رابطه هوش اخلاقی و مهارت های اجتماعی با عملکرد تحصیلی دانش آموزان دبیرستان های سنندج

    پرسشنامه رابطه هوش اخلاقی و مهارت های اجتماعی با عملکرد تحصیلی دانش آموزان دبیرستان های سنندج ابعاد هوش اخلاقی مهارت های اجتماعی اصول ضروری هوش اخلاقی عوامل مؤثر در عملکرد تحصیلی نظریه های پیشرفت تحصیلی مراحل آماده سازي مهارت هاي…

  • پاورپوینت امنیت سیستمهای اطلاعات حسابداری

    پاورپوینت امنیت سیستمهای اطلاعات حسابداری کلمات کلیدی : پاورپوینت امنیت سیستمهای اطلاعات حسابداری تحقیق امنیت سیستمهای اطلاعات حسابداری امنیت سیستمهای اطلاعات حسابداری تاریخچه سیستم های حسابداری در ایران گام‌های پیاده‌سازی سیستم‌های امنیت اطلاعات مهمترین عامل توانایی وقدرت حفاظت از اطلاعات…

  • پاورپوینت آموزشی مفهوم احتمال صفحه 112 ریاضی ششم ابتدایی

    پاورپوینت آموزشی مفهوم احتمال صفحه 112 ریاضی ششم ابتدایی رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آموزشی مفهوم احتمال صفحه 112 ریاضی ششم ابتدایی در قالب 15 اسلاید و با فرمت pptx بصورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش  …

  • بررسی نظریات شکل گیری هویت و بحران هویت در نوجوانان و جوانان

    بررسی نظریات شکل گیری هویت و بحران هویت در نوجوانان و جوانان کلمات کلیدی : هویت و ابعاد آن نظریه های هویت مولفه های هویت پایان نامه انواع هویت نظریه هویت اریکسون نظریات شکل گیری هویت هویت یابی در نوجوانان…

  • علایم ایمنی محافظت در برابر آتش‌سوزی

    علایم ایمنی محافظت در برابر آتش‌سوزی ایمنی علایم ایمنی محافظت در برابر آتش‌سوزی سیستم همکاری در فروش فایل همکاری در فروش فایل همکاری در فروش فروش فایل دانلود مقاله و تحقیق ایمنی فروشگاه فایل خرید مقاله و تحقیق ایمنی رفتن…

  • پاورپوینت مدرسه ایولین گریس و تصاویری از قسمت های مختلف داخلی و خارجی مدرسه

    پاورپوینت مدرسه ایولین گریس و تصاویری از قسمت های مختلف داخلی و خارجی مدرسه پاورپوینت مدرسه ایولین گریس پاورپوینت مدرسه ی ایولین گریس پاورپوینت تحلیل مدرسه ایولین گریس دانلود پاورپوینت مدرسه ایولین گریس رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت مدرسه…

  • پاورپوینت ویژگی ها و نحوه شکل گیری سیاهچاله

    پاورپوینت ویژگی ها و نحوه شکل گیری سیاهچاله دانلود پاورپوينت مطالبی درمورد سیاهچاله دانلود پاورپوينت درمورد مطالبی درمورد سیاهچاله رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوينت مطالبی درمورد سیاهچاله  جهت رشته نجوم  در قالب 24 اسلايد و با فرمت pptx به صورت کامل و…

  • دانلود پاورپوینت کتاب مبانی مدیریت دولتی 2

    دانلود پاورپوینت کتاب مبانی مدیریت دولتی 2 پاورپوینت کتاب مبانی مدیریت دولتی 2 پیام نور پاورپوینت جزوه مبانی مدیریت دولتی 2 پاورپوینت خلاصه کتاب مبانی مدیریت دولتی 2 پاورپوینت کتاب مبانی مدیریت دولتی 2 رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت…

  • نظریه های حوزه های مختلف در مورد سازگاری و سازگاری اجتماعی

    نظریه های حوزه های مختلف در مورد سازگاری و سازگاری اجتماعی نظریه های سازگاری اجتماعی pdf نظریه های مربوط به سازگاری نظریه های روانشناسی سازگاری نظریه های جامعه شناسی سازگاری اجتماعی نظریه های مددکاری اجتماعی سازگاری دیدگاه های مختلف سازگاری…

  • پاورپوینت آموزش تدریس حرف ف

    پاورپوینت آموزش تدریس حرف ف رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آموزش تدریس حرف ف به کودکان کلاس اول ابتدایی در قالب 13 اسلاید و با فرمت pptx بصورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش       این…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق برون سپاری 2

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق برون سپاری 2 مبانی نظری برون سپاری ادبیات نظری برون سپاری چارچوب نظری برون سپاری فصل دوم پایان نامه برون سپاری دانلود مبانی نظری برون سپاری پیشینه برون سپاری پیشینه تحقیق برون سپاری پیشینه داخلی…

  • پاورپوینت آموزشی درس برنامه ريزی و کنترل موجودی 1

    پاورپوینت آموزشی درس برنامه ريزی و کنترل موجودی 1 رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آموزشی درس برنامه ريزی و کنترل موجودی 1 جهت رشته حسابداری در قالب 161 اسلاید و با فرمت ppt به صورت کامل و جامع و…

  • مسئولیت مدنی دولت بر مبنای قاعده اتلاف

    مسئولیت مدنی دولت بر مبنای قاعده اتلاف قاعده اتلاف مسئولیت مدنی مسئولیت مدنی دولت دانلود مقاله مسئولیت مدنی دولت بر مبنای قاعده اتلاف دانلود مقاله مسئولیت مدنی دولت دانلود مقاله کارشناسی ارشد رشته حقوق رفتن به سایت اصلی دانلود مقاله…

  • پاورپوینت آموزش تدریس درس ششم عربی هشتم - قسمت سوم

    پاورپوینت آموزش تدریس درس ششم عربی هشتم - قسمت سوم رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آموزش تدریس درس ششم عربی هشتم - قسمت سوم به دانش آموزان کلاس هشتم متوسطه اول در قالب 14 اسلاید و با فرمت pptx…

  • پاورپوینت اصول هک و امنیت

    پاورپوینت اصول هک و امنیت پاورپوینت اصول هک پاورپوینت اصول امنیت پاورپوینت هکر پاورپوینت هکر ها پاورپوینت درباره هکرها پاورپوینت درباره هک دانلود پاورپوینت هک پاورپوینت در مورد هکر پاورپوینت هک و هکر پاورپوینت درباره هک و هکر دانلود پاورپوینت…

  • پاورپوینت روانشناسي كودك

    پاورپوینت روانشناسي كودك پاورپوینت روانشناسي كودك تحقیق روانشناسي كودك روانشناسي كودك بررسی روانشناسي كودك روانشناسي كودك اهداف بهداشتي در دوران كودكي و نوجواني مراحل درك كودك هيجانات كودكان سبك هاي چهار گانه فرزند پروي پنج مرحله اصلي پرورش هيجان رفتن…

  • پروژه رشته طراحی و ایجاد صنایع با عنوان کفپوش پی وی سی

    پروژه رشته طراحی و ایجاد صنایع با عنوان کفپوش پی وی سی pvc کامپوزیت مصنوعی کفپوش پی وی سی صنایع شیمیایی و پتروشیمی دانلود پروژه رشته طراحی و ایجاد صنایع خرید پروژه رشته طراحی و ایجاد صنایع سیستم همکاری در…

  • امنیت در پرداخت و تراکنش های الکترونیکی

    امنیت در پرداخت و تراکنش های الکترونیکی کلمات کلیدی : امنیت در پرداخت الکترونیکی امنیت در پرداخت های اینترنتی تهدیدات امنیتی در تراکنش الکترونیکی امنیت در سیستم های پرداخت الکترونیکی پرداخت و امنیت در تجارت الکترونیکی پایان نامه تراکنشهای الکترونیکی…